Súprava na extrakciu alebo čistenie nukleových kyselín
Nukleický Acid Eextrakcia Or Prečistenie Kitalebo skladované pri -20 ℃. Vzorka by sa mala prepravovať pomocou zvlnenia pri 0 °C.
Introduction
Súprava na extrakciu alebo purifikáciu nukleových kyselín (metóda magnetických guľôčok) je navrhnutá na automatickú purifikáciu RNA a DNA z telesných tekutín (ako sú tampóny, plazma, sérum) pomocou automatických nástrojov na extrakciu nukleových kyselín. Technológia magnetických častíc poskytuje vysokokvalitnú DNA/RNA, ktorá je vhodná na priame použitie v následných aplikáciách, ako je amplifikácia alebo iné enzymatické reakcie.
Application Range
Vzorky plnej krvi, plazmy, séra a iných tkanív boli priamo lyzované a štiepené. Uvoľnená nukleová kyselina bola selektívne adsorbovaná super paramagnetickými nanometrovými magnetickými guľôčkami. Potom sa proteín, ióny anorganických solí a organické nečistoty odstránili premývacím roztokom. Nakoniec sa nukleová kyselina eluovala eluentom, aby sa získal čistý roztok nukleovej kyseliny.
Kit Contents
Cat. Nie | YXN-VIRAL01-32A-BR | Komponenty | ||
-50A | - 100A | |||
Veľkosť | 32 Tes | 50 Test | 100 Test | |
Lysis Buffer | 96 jamiekPrebaliť ed Dosky 2 kusy | 25 ml | 50 ml | Surfaktant a Tris |
Premývací pufer I | ★15 ml | ★30 ml | Roztok s vysokým obsahom soli | |
Wash Buffer Il | ★6ml*2 | ★12ml*2 | Roztok s nízkym obsahom soli | |
Elution Buffer | 10 ml | 20 ml | Roztok s nízkym obsahom soli | |
MagaBio činidlo | 1,0 ml | 2,0 ml | Magnetické častice | |
Príručka(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Npoznámky:PreYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,pred použitím pridajte 15 ml absolútneho etanolu do ★15 ml premývacieho pufra I; pred použitím pridajte 24 ml absolútneho etanolu do ★6 ml premývacieho pufra II. | ||||
PreYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, pred použitím pridajte 30 ml absolútneho etanolu do ★30 ml premývacieho pufra I; pred použitím pridajte 48 ml absolútneho etanolu do ★12 ml premývacieho pufra II.【Reagenty, ktoré si pripraví používateľ】Pripravte si absolútny etanol (analytická kvalita) sami. |
Storage Conditions
Po dodaní súpravy môžu byť komponenty súpravy skladované pri izbovej teplote (15 − 25 °C). Reagencie sú stabilné až jeden rok od dátumu výroby.
Sample Requirements
1. Použiteľná vzorka: tampóny, plazma, sérum a celá krv atď.
2. Skladovanie a preprava vzorky: Vzorka by sa mala okamžite otestovať
Materials a Devices Required but Not Provided
1. Jednorazové rukavice bez púdru
2. Nádoba na biologické nebezpečenstvo
3. Ceruzka alebo per
Procedure
V nasledujúcom texte je ako príklad použitý tampón na extrakciu prúžkov vzorky na stručné vysvetlenie prevádzkových krokov extrakčného činidla na biologickom zariadení na extrakciu nukleových kyselín.Bioer NPA-32PaleboSMART 32. Ďalšie typy vzoriek nájdete v používateľskej príručke. Môžu ho prevádzkovať aj zákazníci podľa experimentálneho získania:
1. Činidlo Príprava
a. PreYXN-VB03-32A-50A a YXN-VB03-32A-100A
Pridajte 500 ul lyzačného pufra do stĺpca 1 a 7 2,2 ml 96-jamkovej platne, 500 ul premývacieho pufra I do stĺpca 2 a 8, 500 ul premývacieho pufra II do stĺpca 3, 4 a 9,10; 70 ul Elution Buffer do stĺpca 5 a 11, 180 ul čistej vody a 20 ul MagaBio Reagent do stĺpca 6 a 12 (magnetické guľôčky by sa mali pred použitím dôkladne premiešať),
b. PreYXN-VB03-32A
Umiestnite 96 jamiek vopred zabalené reagencie pri izbovej teplote. 96-jamkovú platňu trikrát pretrepte hore dnom a odtrhnite plastový obal. Predbalené činidlo centrifúgujte niekoľko sekúnd (alebo niekoľkokrát zakývajte rukou), aby sa činidlo neprilepilo na steny skúmaviek. Odtrhnite film z hliníkovej fólie z 96-jamkovej platne a identifikujte smer platne (magnetické guľôčky v stĺpci #6 a #12),
2.Ukážka Extrakcia
1. Pridajte 300 ul vzorky do 96-jamkových stĺpcov #1 a #7, zabráňte krížovej kontaminácii,
2. Umiestnite dosku s 96 hlbokými jamkami k prístroju, nainštalujte hroty s 8 prúžkami na prístroj,
3. Spustite program podľa nasledujúcich postupov,
4. Po skončení automatického čistenia preneste elučný pufor v stĺpcoch 5 a 11 do čistej antinukleárnej 0,5 ml centrifugačnej skúmavky; ak ho nepoužijete ihneď, skladujte pri teplote -20 °C.
Performance Characteristics
1. Extrahovaný produkt sa deteguje vysoko citlivým detekčným činidlom HBV DNA, aby sa dosiahla citlivosť 10 IU/ml. Extrahovaný produkt sa deteguje vysoko citlivým detekčným činidlom HCV RNA, aby sa dosiahla citlivosť 50 IU/ml.
2. Vyberte 4 vzorky (vzorka séra/plazmy, vzorka tampónu z nosohltanu, vzorka cervikálnych exfoliovaných buniek), každá vzorka sa zriedi 10-krát 3 gradientmi (vrátane pôvodnej vzorky spolu so 4 koncentráciami), použitím kvalifikovaných činidiel a testovacích činidiel na detekciu vnútorných referenčný gén podľa pokynov k produktu a hodnota Ct každej šarže sa líši o menej ako 1.
Step | Dobre Poloha | Prgram Meno | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mv:SS) | Magnet Time(min:SS) | Aadsorpcia | Scikať | Volume tatus (μl) | Tteplota |
1 | 1 | Lysis | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wjaseň1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wjaseň2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wjaseň3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Elúcia | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Zahodiť | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL BEZPEČNOSŤ.
Používanie tohto produktu spôsobom, ktorý nie je špecifikovaný v používateľskej dokumentácii, môže viesť k zraneniu osôb alebo poškodeniu prístroja alebo zariadenia. Zabezpečte, aby každý, kto používa tento produkt, dostal pokyny o všeobecných bezpečnostných postupoch pre laboratóriá a bezpečnostné informácie uvedené v tomto dokumente.
1.1 Pred použitím nástroja alebo zariadenia si prečítajte a pochopte bezpečnostné informácie uvedené v používateľskej dokumentácii poskytnutej výrobcom nástroja alebo zariadenia.
1.2 Pred manipuláciou s chemikáliami si prečítajte a pochopte všetky príslušné karty bezpečnostných údajov (KBÚ) a používajte vhodné osobné ochranné prostriedky (rukavice, plášte, ochranu očí atď.). Ak chcete získať KBÚ, pozrite si časť „Dokumentácia a podpora“ v tomto dokumente.
2. Chemický bezpečnosť
VŠEOBECNÉ CHEMICKÉ ZAOBCHÁDZANIE. Aby ste minimalizovali nebezpečenstvá, zaistite, aby si laboratórny personál prečítal a uplatnil všeobecné bezpečnostné pokyny pre chemické použitie, skladovanie a odpad uvedené nižšie, a preštudujte si príslušnú KBÚ, kde nájdete konkrétne bezpečnostné opatrenia a pokyny: Prečítajte si a pochopte karty bezpečnostných údajov (KBÚ) poskytnuté chemikáliou. výrobcu predtým, ako budete skladovať, manipulovať alebo pracovať s akýmikoľvek chemikáliami alebo nebezpečnými materiálmi.
2.1 Minimalizujte kontakt s chemikáliami. Pri manipulácii s chemikáliami noste vhodné osobné ochranné prostriedky (napríklad ochranné okuliare, rukavice alebo ochranný odev).
2.2 Minimalizujte vdychovanie chemikálií. Nenechávajte nádoby s chemikáliami otvorené. Používajte len pri dostatočnom vetraní (napríklad digestor).
2.3 Pravidelne kontrolujte, či nedochádza k úniku alebo rozliatiu chemikálií. Ak dôjde k úniku alebo rozliatiu, postupujte podľa pokynov výrobcu na čistenie podľa odporúčaní v KBÚ.
2.4 Manipulujte s chemickým odpadom v digestore.
2.5 Zabezpečiť používanie nádob na primárny a sekundárny odpad. (Primárny odpad
kontajner obsahuje bezprostredný odpad. Sekundárna nádoba obsahuje úniky alebo úniky z primárnej nádoby. Oba kontajnery musia byť kompatibilné s odpadovým materiálom a spĺňať federálne, štátne a miestne požiadavky na skladovanie kontajnerov.).
2.6 Po vyprázdnení odpadovej nádoby ju uzavrite dodaným uzáverom.
2.7 Charakterizujte (v prípade potreby analýzou) odpad, ktorý vzniká pri konkrétnych aplikáciách, činidlách a substrátoch používaných vo vašom laboratóriu.
2.8 Zabezpečte, aby sa odpad skladoval, premiestňoval, prepravoval a likvidoval v súlade so všetkými miestnymi, štátnymi/provinčnými a/alebo národnými predpismi.
2.9 Rádioaktívne alebo biologicky nebezpečné materiály môžu vyžadovať špeciálne zaobchádzanie a môžu platiť obmedzenia týkajúce sa likvidácie.
3.Biologické nebezpečenstvo bezpečnosť
Potenciálne biologické nebezpečenstvo. V závislosti od vzoriek použitých na tomto prístroji môže byť povrch považovaný za biologicky nebezpečný. Pri práci s biologickými nebezpečnými látkami používajte vhodné metódy dekontaminácie.
BIOHAZARD. Biologické vzorky, ako sú tkanivá, telesné tekutiny, infekčné agens a krv ľudí a iných zvierat, majú potenciál prenášať infekčné choroby. Dodržiavajte všetky príslušné miestne, štátne/provinčné a/alebo národné predpisy. Noste vhodné ochranné prostriedky, ktoré okrem iného zahŕňajú: ochranné okuliare, štít na tvár, odev/laboratórny plášť a rukavice. Všetky práce by sa mali vykonávať v riadne vybavených zariadeniach s použitím vhodného bezpečnostného vybavenia (napríklad fyzického ochranného zariadenia). Jednotlivci by mali byť pred prácou s potenciálne infekčnými materiálmi vyškolení v súlade s platnými regulačnými požiadavkami a požiadavkami spoločnosti/inštitúcie.
Prečítajte si a dodržiavajte príslušné pokyny a/alebo regulačné požiadavky v nasledujúcom texte:
V USA: Usmernenia Ministerstva zdravotníctva a sociálnych služieb USA uverejnené v Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories nájdete na: www.cdc.gov/biosafety.
Normy bezpečnosti a ochrany zdravia pri práci, krvou prenášané patogény (29 CFR§1910.1030), nájdete na:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
Protokoly Programu biologickej bezpečnosti vašej spoločnosti/inštitúcie pre prácu s potenciálne infekčnými materiálmi a manipuláciu s nimi. Ďalšie informácie o pokynoch pre biologické nebezpečenstvo sú dostupné na: www.cdc.gov.
V EÚ: Pozrite si miestne usmernenia a legislatívu o biologickom nebezpečenstve a preventívnych opatreniach v oblasti biologickej bezpečnosti a pozrite si osvedčené postupy uverejnené v Príručke laboratórnej biologickej bezpečnosti Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO), tretie vydanie, nájdete na: www.who.int/csr/resources/publications /biologická bezpečnosť/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/sk/.